PROSEDUR HISTOLOGI : KOLEKSI SAMPEL OTAK

-
Koleksi sampel bertujuan untuk mendapatkan organ yang kita ingin teliti yang selanjutnya dapat digunakan untuk pembuatan blok paraffin guna pewarnaan secara histologi maupun imunohistokimia. Berikut adalah contoh perfusi pada tikus untuk mendapatkan sampel otak.

Sebelum otak dikoleksi, tikus di anastesi tiletamine 2,5% (Zoletil 50, Verbac) dengan dosis 25 mg/kg dan xylazin 2% (Xyla, Interchemie) dosis 10 mg/kg berat badan intramuscular (i.m) (Hedenqvist dan Hellebrekers, 2003). Dalam keadaan teranatesi, tikus diperfusi secara intrakardial dengan cara membuka rongga dada dan kemudian jarum suntik perfusi dimasukkan ke dalam ventrikel kiri. Selanjutnya larutan pre-rinse berupa 500 cc NaCl 0,9% + 1cc EDTA 10%. Setelah jantung terisi larutan pre-rinse maka atrium kanan dibuka dengan cara digunting supaya darah dan larutan keluar dari jantung. Pada saat larutan perfusi yang keluar tidak lagi mengandung darah maka larutan perfusi diganti dengan  larutan fiksatif berupa formalin 10% dalam PBS 0,01M selama 20-25 atau hingga jaringan terfiksir. Kecepatan aliran masuknya larutan perfusi diturunkan selama perfusi berlangsung. Setelah proses perfusi selesai dilakukan koleksi sampel otak.
Gambar 1. gambar perfusi intrakardial pada tikus (Irawan, 2012).


Gambar 2.  Sketsa perfusi secara intrakardial dan koleksi sampel otak (Gage et al., 2012) 

Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. 2012. Whole Animal Perfusion Fixation for Rodents. J Vis. Exp. (65), e3564, doi:10.3791/3564

Irawan, V., 2012. Thesis: Efek protektif ekstrak etanol pegagan (centella asiatica (l.) Urban) terhadap proliferasi sel formasi hippocampus tikus dewasa pada kondisi stres kronis. Veterinary Science, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia.

Postingan populer dari blog ini

Metabolisme Zinc Pada Manusia Dan Hewan (Anjing & Kucing)

-
Gambar
Dietary Zinc Pada Manusia, Zinc tidak disimpan di dalam tubuh sehingga dietary intake zinc secara konstan adalah hak yang essential.  Tabel 1. Kebutuhan zinc pada manusia Pada anjing dan kucing, zinc tersedia dan disimpan di jaringan tubuh Tabel 2. Kebutuhan zinc pada anjing Tabel 3.   J umlah kandungan zink dalam makanan Zinc secara normal didapat dari daging merah dan protein hewani lainnya, namun kandungan zink yang ditemui tidak dalam jumlah yang tinggi. Zinc yang terikat dengan ligan akan memfasilitasi untuk absorpsi. Pada kebanyakan tumbuhan seperti jagung dan beras tidak berfungsi sebagai sumber zinc. Pada tumbuhan terdapat pytate yang dapat menhambat absorosi zinc karena terjadinya chelated zinc. Tingginya insidensi defisiensi zink\c dapat terjadi akibat diet protein hewan yang rendah, mengkonsumsi banyak pytate, serta rendahnya kandungan zinc di tanah. Keseimbangan Zinc (Zn) Homeostatis zinc dipengaruhi oleh absorpsi eksogen...
Baca selengkapnya

PROSEDUR HISTOLOGI: PEMBUATAN BLOK PARAFFIN DAN PEMOTONGAN

-
Gambar
Pembuatan blok paraffin merupakan prosedur histologi lanjutan setelah melakukan  koleksi sampel . Koleksi sampel dapat dilakukan secara perfusi. Berikut adalah contoh pembuatan blok paraffin pada otak tikus beserta pemotongan preparat secara serial menggunakan mikrotome Pembuatan blok parafin preparat otak Irisan otak dimasukkan ke dalam kain kasa, didehidrasi dengan direndam  dalam larutan etanol bertingkat yaitu 70%, 80%, 90%, 100%, 100% dan 100%  masing-masing selama 60 menit pada suhu kamar. Proses selanjutnya dilakukan penjernihan ( clearing ) menggunakan  xylol  selama 15 menit pada suhu kamar sebanyak tiga kali. Setelah proses  clearing , dilakukan proses infiltrasi dengan parafin cair sebanyak 3 kali pemindahan masing-masing 60 menit dalam inkubator suhu 60 ºC. Jaringan kemudian dibenamkan atau ditanam di dalam parafin cair dan didinginkan pada suhu kamar sehingga menjadi blok parafin.  Gambar 1. Otak yang dikoleksi kemudian dipr...
Baca selengkapnya

Ultrasonography (Usg) dan Aplikasinya Pada Pemeriksaan Organ Reproduksi Serta Diagnosa Kebuntingan & Foetal Sexing Pada Ternak

-
Gambar
Ultrasonography (USG) digunakan sebagai alat diagnose pada sistem reproduksi betina dan memiliki nilai ekonomis untuk menentukan kebuntingan awal pada ternak (DesCôteaux et al., 2006a). Pada artikel ini dibahas tentang prinsip dasar USG, tipe USG, komponen USG, gambaran USG dari organ reproduksi serta diagnose kebuntingan & foetal sexing pada ternak. PRINSIP DASAR USG Gambaran USG terbentuk dari intensitas gelombang suara yang dipantulkan kembali oleh jaringan kepada probe (transducer). Berdasarkan kekuatan intensitas tersebut dapat dievaluasi bentuk, kontur, ukuran serta posisi dari struktur yang dipelajari. Struktur echogenic terbentuk dari pantulan gelombang suara yang tervisualisasi sebagai warna putih hingga abu-abu pada monitor, sedangkan struktur yang tidak bersifat echoes ( anechogenic ) seperti cairan folikel akan mentransmisikan gelombang sehingga tervisualisasikan sebagai warna hitam (DesCôteaux et al., 2006a). Gambar 1. Terminologi echotexture. Jarin...
Baca selengkapnya