HISTOLOGI FORMASI HIPPOKAMPUS MELALUI PEWARNAAN CRESYL ECHT VIOLET

-
Formasi hippokampus dapat dibagi menjadi girus dentatus (DG), cornu ammonis 1 (CA1), cornu ammonis  (CA2), cornu ammonis 3 (CA3) dan subikulum (Irawan, 2008) 


Gambar 1. Pembagian area pada formasi hippocampus. Girus dentatus (DG) dibagi menjadi lapisan granular, molekular, dan polimorfik, sedangkan cornu ammonis (CA) dibagi menjadi  stratum pyramidale, oriens, dan radiatum-lacunosum-moleculare (Harry dan d’Hellencourt, 2003).




Metode Pewarnaan Cresyl Echt Violet (Irawan, 2008)
  1. Slide jaringan dalam parafin yang akan diwarnai dengan cresyl echt violet diatur dalam rak pewarnaan, kemudian diinkubasi pada suhu 60 ⁰C selama 2 jam. Tujuan inkubasi ini adalah menguatkan lagi perlekatan atau adhesi jaringan dengan slide
  2. Slide dikeluarkan dari inkubator dan disimpan pada suhu ruang untuk diwarnai pada hari berikutnya atau minimal 90 menit pada suhu ruang. Tujuannya agar suhu slde jaringan kembali pada suhu ruang sebelum dilakukan proses selanjutnya.
  3. Selanjutnya dilakukan deparafinisasi dengan xilol sebanyak tiga kali masing-masing selama lima menit
  4. Kemudian slide rehidrasi dengan memasukkan slide jaringan ke dalam alkohol bertingkat dari alkohol absolut dua kali, alkohol 95% dua kali, alkohol 80 %, alkohol 70% masing-masing lima menit, dan dicelup dalam aquades hingga alkohol hilang.
  5. Setelah proses rehidrasi, slide jaringan dimasukkan dalam cresyl echt violet (Chroma, 1A 396) selama 30 menit pada suhu 37⁰ C,
  6. Kemudian  didehidrasi dengan alkohol 70% sampai dengan alkohol absolut masing-masing lima celup,
  7. Selanjutnya dilakukan clearing dalam  xilol sebanyak tiga kali masing-masing dua menit. Slide yang telah diwarnai ditutup dengan kaca penutup (mounting) yang sebelumnya telah ditetesi dengan xilol dan mounting medium Canada balsam (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) (metode dimodifikasi dari Luna, 1968).
Hasil Pewarnaan
Gambar 2. Gambaran histologi formasi hippokampus fetus monyet ekor panjang dengan pewarnaan cresyl echt violet. Girus dentatus (A), CA3 (B), CA2 (C), CA1 (D), subikulum (E), lapisan granuler (g), lapisan piramidal (p) (Irawan, 2008) 



Gambar 3. CA1, CA2, dan CA3 didominasi oleh lapisan piramidal (Irawan, 2008)


Girus dentatus memiliki lapisan granuler yang terdiri dari neuron-neuron tersusun padat sehingga mudah untuk diidentifikasi, sedangkan CA1, CA2, CA3, dan subikulum didominasi oleh lapisan piramidal.  Girus dentatus dibagi menjadi tiga lapisan yaitu lapisan molekuler, lapisan granuler, dan lapisan polimorfik. Area CA1 dan CA2 dibagi menjadi stratum molekuler-lakunosum, stratum  radiatum, stratum piramidal, dan stratum oriens. Area CA3 dibagi menjadi stratum molekuler-lakunosum, stratum radiatum, stratum lusidum, stratum piramidal, stratum oriens (Kumar et al., 2001). Sedangkan area subikulum ditempati oleh sebagian besar dari stratum piramidal (Witter dan Amaral, 2004).


Daftar pustaka
Harry, G.J., dan d’Hellencourt, C.L., 2003. Dentate gyrus: Alterations that occur with hippocampal injury. NeuroToxicology. 24:343-356.

Irawan, V., 2008. Skripsi: Keberadaan dan distribusi map-2 terfosforilasi di korteks serebrum fetus monyet ekor panjang (macaca fascicularis) pada trisemester akhir kebuntingan. Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia.

Luna, L.G., 1968. Manual of histologic staining methods of the Armed Forces Institute of Pathology. In L.G. Luna (Ed.), New York: McGraw-Hill, hlm. 212-213.

Kumar, P. A., Baker, L. P., Storm, D. R., dan Bowden, D. M., 2001. Expression of Type I Adenylyl Cyclase in Intrinsic Pathways of The Hippocampal Formation of Macaque (Macaca nemestrina). Neurosci. Letts.299:181-184.

Witter, M.P., dan Amaral, D.G., 2004. Hippocampal Formation, dalam The Rat Nervous System, 3th ed., Elsevier.hlm.635-704.

Postingan populer dari blog ini

Metabolisme Zinc Pada Manusia Dan Hewan (Anjing & Kucing)

-
Gambar
Dietary Zinc Pada Manusia, Zinc tidak disimpan di dalam tubuh sehingga dietary intake zinc secara konstan adalah hak yang essential.  Tabel 1. Kebutuhan zinc pada manusia Pada anjing dan kucing, zinc tersedia dan disimpan di jaringan tubuh Tabel 2. Kebutuhan zinc pada anjing Tabel 3.   J umlah kandungan zink dalam makanan Zinc secara normal didapat dari daging merah dan protein hewani lainnya, namun kandungan zink yang ditemui tidak dalam jumlah yang tinggi. Zinc yang terikat dengan ligan akan memfasilitasi untuk absorpsi. Pada kebanyakan tumbuhan seperti jagung dan beras tidak berfungsi sebagai sumber zinc. Pada tumbuhan terdapat pytate yang dapat menhambat absorosi zinc karena terjadinya chelated zinc. Tingginya insidensi defisiensi zink\c dapat terjadi akibat diet protein hewan yang rendah, mengkonsumsi banyak pytate, serta rendahnya kandungan zinc di tanah. Keseimbangan Zinc (Zn) Homeostatis zinc dipengaruhi oleh absorpsi eksogen...
Baca selengkapnya

PROSEDUR HISTOLOGI: PEMBUATAN BLOK PARAFFIN DAN PEMOTONGAN

-
Gambar
Pembuatan blok paraffin merupakan prosedur histologi lanjutan setelah melakukan  koleksi sampel . Koleksi sampel dapat dilakukan secara perfusi. Berikut adalah contoh pembuatan blok paraffin pada otak tikus beserta pemotongan preparat secara serial menggunakan mikrotome Pembuatan blok parafin preparat otak Irisan otak dimasukkan ke dalam kain kasa, didehidrasi dengan direndam  dalam larutan etanol bertingkat yaitu 70%, 80%, 90%, 100%, 100% dan 100%  masing-masing selama 60 menit pada suhu kamar. Proses selanjutnya dilakukan penjernihan ( clearing ) menggunakan  xylol  selama 15 menit pada suhu kamar sebanyak tiga kali. Setelah proses  clearing , dilakukan proses infiltrasi dengan parafin cair sebanyak 3 kali pemindahan masing-masing 60 menit dalam inkubator suhu 60 ºC. Jaringan kemudian dibenamkan atau ditanam di dalam parafin cair dan didinginkan pada suhu kamar sehingga menjadi blok parafin.  Gambar 1. Otak yang dikoleksi kemudian dipr...
Baca selengkapnya

Ultrasonography (Usg) dan Aplikasinya Pada Pemeriksaan Organ Reproduksi Serta Diagnosa Kebuntingan & Foetal Sexing Pada Ternak

-
Gambar
Ultrasonography (USG) digunakan sebagai alat diagnose pada sistem reproduksi betina dan memiliki nilai ekonomis untuk menentukan kebuntingan awal pada ternak (DesCôteaux et al., 2006a). Pada artikel ini dibahas tentang prinsip dasar USG, tipe USG, komponen USG, gambaran USG dari organ reproduksi serta diagnose kebuntingan & foetal sexing pada ternak. PRINSIP DASAR USG Gambaran USG terbentuk dari intensitas gelombang suara yang dipantulkan kembali oleh jaringan kepada probe (transducer). Berdasarkan kekuatan intensitas tersebut dapat dievaluasi bentuk, kontur, ukuran serta posisi dari struktur yang dipelajari. Struktur echogenic terbentuk dari pantulan gelombang suara yang tervisualisasi sebagai warna putih hingga abu-abu pada monitor, sedangkan struktur yang tidak bersifat echoes ( anechogenic ) seperti cairan folikel akan mentransmisikan gelombang sehingga tervisualisasikan sebagai warna hitam (DesCôteaux et al., 2006a). Gambar 1. Terminologi echotexture. Jarin...
Baca selengkapnya