Postingan

IHC PART 2: IMMUNOLABELLING, IMMUNOPEROXIDASE (HRP), IMMUNOALKALINE PHOSPHATASE (AP), DAN DOUBLE-IMMUNOLABELLING (HRP- HRP ATAU HRP-AP)

Gambar
IMMUNOLAABELLING Imunolabelling adalah proses biokimia dimana antibody dilabel agar dapat mendeteksi antigen pada sel atau jaringan. Berikut adalah prosedur sederhana dalam proses immunolabelling: Gambar 1. Proses Lightning-Link antibody labeling (Innova Biosciences, 2010) Terdapat beberapa jenis label yang sesuai untuk proses IHC yaitu sebagai berikut: Tabel 1. Immunoassay dan labelnya (Innova Biosciences, 2010). Immunoassay Labels Immunofluorescence Fluorescent dyes Immunohistochemistry Enzymes, Biotin/Streptavidin Immunolabelling dapat dibagi menjadi direct dan indirect labelling. Direct labelling berarti label melekat secara ikatan kovalen pada antibody primer, sedangkan indirect labelling berarti label melekat secara kovalen pada antibody sekunder dimana antibody sekunder tersebut nantinya akan berikatan dengan antibody primer saat proses immunoassay (Innova Biosciences, 2010). Berikut adalah pros (keun...

IHC PART 1: ANTIBODY & ANTIGEN, FIKSASI, ANTIGEN RETRIEVAL (AR), ENDOGENOUS BIOTIN, ENDOGENOUS PEROXIDASE

Gambar
Imunohistokimia (IHC) merupakan suatu teknik yang banyak digunakan pada laboratorium veteriner maupun bidang biomedis untuk kepentingan diagnose maupun penelitian. Berikut adalah prosedur standar yang biasa digunakan dalam melakukan IHC (dengan metode avidin biotin complex / ABC method): Tabel 1. Prosedural standar metode ABC dalam teknik IHC ( Ramos-Vara , 2005) Untuk mempelajari tentang teknik IHC ini kita perlu mengenal lebih lanjut aspek-aspek yang mempengaruhi keberhasilan seperti ikatan antibody dan antigen serta faktor-faktor yang menghalang ikatan tersebut dan faktor-faktor yang menghalang munculnya warna pada jaringan yang diwarnai ANTIBODY DAN ANTIGEN Antigen merupakan partikel atau substansi ataupun protein yang ingin kita warnai. Antigen ini nantinya akan berikatan dengan antibody primer. Antibody primer tersebut dapat kita dapati dengan memproduksi sendiri atau umumnya dibeli dari produsen seperti Sigma-Aldrich , Novocastra-Leica biosystems , Th...